本周为大家带来的文献为发表于Int J Parasitol.（IF：3.7）的” Schistosoma japonicum translationally controlled tumour protein, which is associated with the development of female worms, as a target for control of schistosomiasis”。本文使用了LabEx提供的CBA检测服务。

血吸虫病是全球重要的人畜共患蠕虫病，仅次于疟疾的第二大寄生虫病。尽管吡喹酮被广泛用于治疗寄生虫病，但已有抗药性报道。因此，需研发新药和有效疫苗以持续控制血吸虫病。血吸虫产生的虫卵是血吸虫病发生和传播的主要原因。揭示血吸虫的生殖机制将有助于控制该病。

LabEx提供的CBA检测服务

在最后一次接种疫苗后2周，小鼠被处死。每只小鼠的脾细胞通过尼龙羊毛柱富集后，洗涤两次并调整至1 × 10^7 个/mL的浓度。脾细胞被培养在含有10%胎牛血清（Gibco, CA, USA）和1%青霉素-链霉素的RPMI 1640培养基中，放置于37°C、5% CO2的培养箱中。向分离的脾细胞中加入rSjTCTP（25 mg/mL）以检测10种细胞因子（IL-2、IL-4、IL-6、MCP-1、TNF、IFN-γ、IL-9、IL-10、IL-17A和IL-12p70）。其中，IL-2、IL-4、IL-6、MCP-1和TNF的刺激时间为24小时，IFN-γ、IL-9、IL-10、IL-17A和IL-12p70的刺激时间为72小时。刺激后，收集上清液，并通过LabEx采用CBA方法检测细胞因子。

在rSjTCTP刺激后，测定了脾细胞的细胞因子谱。为了避免由于纯化的重组蛋白中可能存在的脂多糖污染而导致的非特异性刺激，向脾细胞培养物中添加了多黏菌素B。与仅使用培养基的对照组相比，免疫动物的脾细胞在rSjTCTP刺激下产生了显著量的IL-2（Th1型细胞因子）和IL-10（Th2型细胞因子）（见表3）。

重要发现

在本研究中，研究者使用等标记相对定量-液相色谱-串联质谱法鉴定了感染18、21、23和25天后的日本血吸虫单性感染雌虫和双性感染成熟雌虫的蛋白质组谱。随后，对差异表达的蛋白质进行了生物信息学分析。研究者选择了6种在成熟雌虫中高表达的差异蛋白，并通过长期的小干扰RNA（siRNA）干扰实验来确定其生物学功能。针对S. japonicum转录调控肿瘤蛋白（SjTCTP）的siRNA对成熟雌虫的生长发育影响最显著。Sjtctp mRNA表达随着时间逐渐增加，并在感染后25-42天保持较高水平，而在成熟雌虫中的表达水平显著高于雄虫和单性雌虫。随后进行的动物免疫保护实验表明，重组SjTCTP（rSjTCTP）使成虫数量减少44.7%（P < 0.01），每克肝脏的平均虫卵负荷减少57.94%（P < 0.01），虫卵孵化率降低47.57%（P < 0.01），单只雌虫产卵量减少43.16%。rSjTCTP诱导小鼠血清IgG、IL-2和IL-10水平升高。总的来说，这些结果表明SjTCTP对雌虫的生殖至关重要，因此是免疫保护的候选抗原。