1、基本原理:
电化学发光是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应,是电化学和化学发光两个过程的完美结合。MSD电化学发光检测技术使用SULFO-TAGTM标记物,在MULTI-ARRAY和MULTI-SPORT微孔板的电极表面通电后,电化学作用激发SULFO-TAGTM标记物发出强光。
2、MSD技术优势
1)更高灵敏度与更宽的线性范围
MSD灵敏度可达0.05pg/ml,有效线性范围达6log(从亚皮克级到几万皮克),能同时兼顾高低丰度蛋白的检测。传统ELISA常规线性范围在10pg/ml-1000pg/ml,采用ultra-sensitivity试剂盒则为0.5-10pg/ml。(对比详情见下图)
2)样本兼容度高,基质效应小
MSD平台由于其独特的电化学发光原理,可将许多非特异信号予以排除,受样本性质的影响更小,因此对于各类生物学样本的兼容度高。目前测定样本包括但不限于:血清,血浆,培养上清,细胞/组织裂解液,脑脊液,尿液,眼睛房水,灌洗液等生物学样本。
3)节省样本用量,可实现多重检测
传统ELISA每孔所需样本量一般为50-100ul。MSD通过点阵技术,在96孔石墨电极板里,可实现每孔25μL样本,10个指标的检测,为珍稀样本的研究提供了更多的数据。
4)实验流程简便、快速、多元化
MSD提供了更为便捷快速的实验流程,通常只需4-5小时,即可完成整个检测流程,简要步骤如下:
5)信号稳定且不受显色顺序影响
MSD由于基于电化学发光原理,信号分子SULFO-TAG需在电激发的情况下才能产生信号,因此整个实验流程无需避光,每孔激发与信号采集时长统一,避免了像ELISA底物与终止液加入顺序先后所导致的数据差异,不受操作人员技术水平差异的影响。请见下图电化学发光平台示意图:
3、应用范围
4、结果展示
本研究是纳入30例iRBD患者、30例PD患者和30例年龄和性别匹配的健康对照(HC)。用MSD技术测量血浆外泌体α-synuclein水平(如下图)。结果表明iRBD和PD患者均存在白细胞SNCA低甲基化,SNCA甲基化可能是早期PD诊断的潜在生物标志物。