多因子检测应用文献分享——如何治疗和监控CarT导致的严重CRS
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细胞治疗作为已经相对成熟的治疗效果较好的肿瘤治疗手段,已经在肿瘤的治疗中得到了相应的应用,但相对的,其产生的副作用,也同样对现在的研究提出了挑战,特别是在CRS细胞因子释放综合征方面,细胞因子的监控不论是在研发还是治疗阶段,都是重中之重,那如何解决呢?今天的这篇文章可以给大家带来一些启发。

  

CAR-T治疗的副作用主要表现在两方面:

  

①细胞因子释放综合征(cytokine release syndrome,CRS)

免疫细胞被大量激活并释放大量炎症因子引发的全身严重性炎症反应综合征,主要表现为发热和多器官功能障碍。

  

②神经系统毒性(Immune effector cell-associated neurotoxicity syndrome,ICANS)

CAR-T细胞输入体内后,诱导内源性T细胞和其他免疫细胞的激活,最终导致中枢神经系统(CNS)的发生,临床主要表现为失语,认知能力受损,脑水肿等。

  

文章中提到采用体外血液吸附技术清除患者血液中的内毒素、炎症介质或者其他有害物质。吸附主要分为两大类:分子筛吸附和免疫吸附。分子筛吸附:通过吸附剂携带的电荷非特异性吸附物质。免疫吸附:利用抗原抗体反应特异性吸附特定的物质。

 

  

luminex技术原理

同时利用48因子的液相芯片技术luminex技术进行吸附前后因子的监控,该技术通过对微球包被不同比例的荧光染料实现高通量检测多种分泌性蛋白。相比于传统的ELISA具有多重检测:同时检测100种生物靶标;节省样品:只需低至25μL的样品体积;节省时间:实验过程只需4小时高灵敏度:精确定量下限低至0.1pg/mL。

 

 

整体思路如下:

64岁男性患者 → CD19特异性CAR-T细胞治疗 → 导致患者发生细胞因子风暴 → 体外血液吸附技术 → Luminex检测血清中炎症因子 → 吸附过后血清中炎症因子降低。

吸附前后因子检测的监控情况,表明体外吸附后炎症因子降低。

 

原理:

CAR-T的概述

Chimeric antigen receptor T cell: 嵌合抗原受体T细胞,使正常的T 细胞嵌合特定抗原的受体,从而使T细胞具备特异性的识别和杀伤功能。在临床中,可以应用于癌症的治疗。一般是从患者的外周血中收集T细胞,体外进行T细胞改造和扩增,随后CAR-T再回输给患者。

  

①临床一般流程

 

 

②TCR和CAR抗原受体结构

T细胞改造是在TCR上连接特异性识别肿瘤的单链抗体,在TCR的胞内区域,连接激活T细胞的信号蛋白,从而T细胞可以识别癌细胞并且能够被激活再大量扩增。

 

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蛋白水平:MSD、Luminex、CBA、Elispot、Antibody Array、ELISA、Sengenics
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组织水平:空间多组学、多重荧光免疫组化、免疫组化、免疫荧光
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