小备说流式-小鼠骨髓细胞分群案例分享
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小备说流式-小鼠骨髓细胞分群案例分享

 

LabExBD Celesta3激光12色)对小鼠骨髓细胞进行分群分析实例

 

整个panel全部为包括表面marker、胞内因子和核内转录因子,抗体使用量按照厂商推荐。

 

样本类型:小鼠

 

仪器:BD Celesta

 

实验Panel

配色表

Laser

指标

荧光素

Violet Laser (405nm)

FVS510

BV510

Blue Laser(488nm)

CD11B

FITC

CCR2

PECY7

LY6G

PE

Red Laser(633nm)

GR-1

APC

CD45

APCCY7

 

实验设置:

组别

作用

Blank

调节电压,确认阴性细胞群位置

补偿对照

调节补偿

样本管

正式样本管

  

 

实验步骤:

 

细胞表面染色

(1) 使用冷的 PBS 缓冲液洗细胞两次,再用 1X PBS 缓冲液制成 1X 106 细胞/ml 的悬液。

(2) 设置流式 Blank、补偿对照以及样本管。

(3) 各组依说明书加入适量的FC block2-8°C 避光孵育10 分钟,随后加1ml PBS清洗细胞,离心 500g5min1ml重悬。

(4) 各组依说明书加入适量的死活染料,室温避光孵育 15 分钟,离心 500g5min。随后加1ml Stain Buffer554656)清洗细胞,离心500g5min100 µl 重悬。

(5) 各管依说明书加入适量的细胞表面荧光抗体,常温避光孵育15分钟。随后加1ml PBS 清洗细胞,离心500g5min

 

实验结果:

流式Panel现货清单:

 

详见LabEx网站( www.u-labex.com)或来电咨询!
基因水平:PCR Array、RT-PCR、PCR、单细胞测序
蛋白水平:MSD、Luminex、CBA、Elispot、Antibody Array、ELISA、Sengenics
细胞水平:细胞染色、细胞分选、细胞培养、细胞功能
组织水平:空间多组学、多重荧光免疫组化、免疫组化、免疫荧光
数据分析:流式数据分析、组化数据分析、多因子数据分析
联系电话:4001619919
联系邮箱:labex-mkt@u-labex.com
公众平台:多因子及组学服务专家