样本前处理
1、细胞培养上清:离心10min(4℃,300g),取上清,建议进行两次离心和取上清,-80℃保存(第二次离心3000g)
2、转移到干净的EP管内,如果还有沉淀存在,再以10,000g, 4℃离心15min去除残留沉淀物。
3、细胞培养上清无需稀释即可直接进行分析。但是,如果一定要稀释样品以使最多的靶标检测值落在检测工作范围之内,必须保证稀释后的样品包含同标准品相同的血清或BSA。
4、避免反复(>2)冻融。
5、血清中含有某些细胞因子(TGF-β),建议无血清或低血清条件培养基。
6、不同细胞可根据生长状况确定培养时间。
注意事项
1、若检测TGF-β指标,不可加入胎牛血清进行培养
2、如果是无血清培养,则需要额外添加5-10%的血清或5-1%的BSA以稳定目标蛋白,避免吸附。
3、建议培养细胞时准备复孔(避免边缘效应)。
4、如果不马上使用样品,则放置于-80℃冰箱保存,强烈建议分装,每管100-300ul,否则反复冻融将严重影响检测的重复性和数据的可比性。
运输条件
温度:干冰运输
样本体积:参照样本量需求说明
样品标记:编号尽量简单1-2-3-4……
样本处理视频
细胞上清液:https://www.u-labex.com/article-6057.html