1.样本选择

Q:多因子实验适用的样本类型有哪些？

A:Serum（血清）、Plasma（血浆）、Cell/ Tissue lysate（细胞／组织裂解液）、细胞上清、Cerebrospinal Fluid（脑脊液）、Bronchoalveolar Lavage Fluid（支气管肺泡灌洗液）、Nasal Lavage（鼻腔灌洗液）、Fluid Peritoneal Fluid（腹腔液）、眼泪、房水、阴道灌洗液等等。

Q:多因子检测用什么样本比较好？

A:推荐以客户的参考文献为准。

Q:细胞因子一般检测分泌型的，为什么需要检测细胞裂解液或者组织裂解液？

A:检测需求不同。分泌型细胞因子，如免疫细胞相关因子，检测上清即可。细胞内或组织内的因子情况，则需检测细胞或组织裂解液。

Q:冻融过的样本会对实验有影响吗？

A:反复冻融势必有影响，未冻融或者1次最好（血清、血浆建议1年以内，反复冻融不超过2次）

Q:抗凝管收集的全血，直接冻存在-80℃，可以用来检测因子吗？

A:不可以。80℃冻存会导致血细胞的破裂，让更多的胞内蛋白进入到血浆中，影响结果。

2.样本体积&浓度

Q:样本体积/浓度要求

A:①Luminex/MSD正式实验：体液：60ul/样本/孔；组织：20mg/样本/孔；细胞：107 /样本/孔 ②Luminex/MSD预实验：建议单独给出预实验样本。体液：100ul/样本；组织：20mg/样本/孔；细胞：107细胞/样本/孔

3.样本运输

Q:细胞因子定量实验的取血管怎么选？

A:血浆：推荐最通用的EDTA抗凝管（紫色）； 血清:推荐空管（红色）/促凝管（橙黄色/淡黄色）

Q:试验后的样本怎么处理？

A:客户如果不需要实验后的样本，我们默认保存3个月。超过3个月默认客户不需要回寄，我们会自行处理。

4. 样本处理：样本类型为血清血浆

Q:血清血浆溶血，对实验结果有影响吗？

A:肯定有影响。溶血是红细胞破裂导致的，轻微溶血都是可以接受的，但从溶血的严重程度看区别较大，样本普遍存在些许溶血情况，目前从文献上看没有明确的数据支持

Q:血浆应该用什么抗凝剂？

A:建议使用EDTA。

Q:血清血浆是立即离心？还是静置？

A:建议两者都在2-4小时内离心，取上清，放入-80保存。 血清：取血后避免晃动，4度静置，自然凝血后离心取上清。 血浆：取血后放入抗凝管，轻轻摇匀，静置后离心取上清。

Q:为什么需要两次离心？

A:目的是为了更彻底的去除杂质和细胞碎片。针对于血清、血浆等有细胞样本，第一次低转速离心，第二次提高转速，有效去除细胞杂质。 5. 样本处理：通用问题

Q:样本处理选什么裂解液？

A:推荐使用多因子组织裂解的裂解液：爱必信abs9225。

Q:细胞、组织裂解液要求有哪些？

A:①不含SDS和NP40；②需另外加酶抑制剂；③建议配方：1*Lysis bufffer（PH=7.5）：NaCl 150mM；Tris, pH=7.5：EDTA 1mM；EGTA 1mM；Triton-X-100 1%。

Q:样本能否帮忙浓缩？

A:不可以。而且浓缩会影响活性。

Q:体液相关的样本，即血浆血清尿液等，是否需要进行BCA总蛋白浓度测定？

A:不需要。这类样本本身蛋白含量较高，细胞上清，无需像组织裂解液或细胞裂解液的检测需要浓度调平。