Q:样本处理方案?
A:
血清:不含抗凝剂的采血管采血,室温静置2小时(避免震动,防止溶血),离心20min(4℃,2000g),取上清,建议再一次离心和取上清,建议分装后-80℃冻存,避免反复冻存
血浆:含抗凝剂(EDTA、肝素,具体采取哪种抗凝剂,参考说明书)的采血管采血,,离心20min(4℃,2000g),取上清,建议再一次离心和取上清,建议分装后-80℃冻存,避免反复冻存
细胞裂解液:收集细胞,PBS清洗后,离心10min(1000g,4℃),弃去上清,加入适量裂解液(107细胞对应200-300ul裂解液),放置于4℃冰箱(20min),离心10min(3000g,4℃),取上清,建议再一次离心和取上清,测定BCA总蛋白浓度,-80℃保存
组织裂解液:适量RIPA裂解液加入组织中(10mg对应100-200ul裂解液),组织破碎器处理组织至匀浆(冰上处理),放置于4℃冰箱(20min),离心10min(3000g,4℃),取上清,建议再一次离心和取上清,测定BCA总蛋白浓度,-80℃保存
细胞上清:离心,取上清,建议分装后-80℃冻存,避免反复冻存
Q:样本保存要求和保存时间?
A:
保存要求:< -20℃保存,-80℃保存更佳,避免反复冻融,冻融超过两次的样本不可使用。
保存时间:越短越好, 不超过3个月为佳
Q:什么样的样本会比较容易测出?
A:根据我们统计的数据来看,并没有这样的说法,需要做实验才可以确认,并且每个客户的样本模型都是不一样的,并没有参考性
Q:裂解液有什么要求?
A:不含SDS和NP40等离子去垢剂成分的裂解液,比较建议爱必信产品(abs47047636)
Q:样本量需求?
A:可登陆试剂盒官方网站查询,一般在试剂盒详情页面中都有,或直接查看说明书。
通常用量在50-200 ul。
实验室打包服务为100 ul/孔