Keywords: Acupuncture; B cell; Experimental autoimmune encephalomyelitis; Sympathetic nerve; β2-AR-cAMP signaling pathway.

本周为大家带来的文献为发表于Int Immunopharmacol. (IF: 5.6)的” Acupuncture at ST36 ameliorates experimental autoimmune encephalomyelitis via affecting the function of B cells”。本文使用了LabEx提供的MSD检测服务。

 

多发性硬化症（MS）是一种以中枢神经系统（CNS）的白质和灰质发生炎性脱髓鞘为特征的自身免疫性疾病。全世界有250多万人患有这种疾病，其中大多数人的年龄在20-40岁之间。然而，多发性硬化症的治疗目前仅限于对症治疗，包括糖皮质激素、免疫抑制剂和B细胞缺失疗法。

 

随着补充和替代医学疗法的发展，其对许多疾病的治疗效果已得到证实。其中，针灸作为一种常用的治疗方法，在多发性硬化症患者中的使用率为7.2 ∼ 21%。针灸对多发性硬化症的疗效也已得到临床证实，但具体机制尚不明确。众所周知，免疫细胞上存在丰富的神经递质受体，如胆碱能受体、肾上腺素能受体（AR）、多巴胺受体、GABA受体等。因此，针灸是否能通过激活交感神经系统和调节免疫细胞功能来治疗EAE尚不清楚。本研究发现，针刺 ST36 可显著提高脾交感神经的兴奋性，促进外周 B 细胞和 CD4+T 细胞向抗炎方向分化。

 

LabEx提供的MSD检测服务：

 

样品在3000g转速下离心10分钟，收集上清液。将300 µl链接剂和200 µl相应的生物素标记抗体混合均匀，室温孵育30分钟。然后向该混合物中加入200 µl终止缓冲液，混匀后室温孵育30分钟。然后，在U-plex MSD板上涂抹制备好的抗体（50 µl/孔），室温下孵育 1小时。然后从每个烧瓶中取50 µl至另一个 EP 管中，用稀释剂稀释至250 µl为最高浓度点，依次稀释4倍，并设7个标准和1个空白。然后吸取60 µl的检测抗体，用稀释剂3稀释至3 ml，作为检测抗体稀释液。另外，准备 1*PBS (0.05% Tween-20) 作为洗涤缓冲液和 2* 读取缓冲液。

 

为了观察针灸是否能通过影响上述炎症过程来缓解EAE，研究者在发病高峰期通过MSD法检测了血清中多种细胞因子的浓度。我们发现针灸可以下调一些促炎细胞因子（IP-10、MIP-3α、IL-17F、IL-23、IL-33、GM-CSF、IFN-γ、IL-12p70、IL-6和IL-12/IL-23p40），上调一些抗炎细胞因子（IL-16、IL-21、IL-10、IL-27p28/IL-30、IL-4、EPO、VEGF-A、IL-5和IL-15）。

  

 

MSD 检测法用于检测血清中细胞因子的浓度。

 

重要发现：

-针刺可延缓EAE的发生，促进外周B细胞和CD4+T细胞向抗炎方向分化。

-用6-OHDA去脾交感神经可逆转针灸的作用。

-针刺可激活 CD4+T 和 B 细胞中的β2-AR-cAMP 信号通路。

-在 B 细胞存在的情况下，NE 可促进 CD4+T 细胞向抗炎方向分化。