抗体药物研发(三)-抗体/补体依赖的细胞效应
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抗体/补体依赖的细胞效应

  

随着生物技术的进步,抗体药物已经成长为最快的治疗药物。抗体即免疫球蛋白,是一种能特异性结合抗原的糖蛋白,抗体包括Fab段和Fc段,Fc段决定抗体的效应功能,包括抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用(ADCC)、抗体依赖性细胞介导的吞噬作用(ADCP)和补体依赖的细胞毒性作用(CDC)。

1)ADCC:抗体的Fab结合细胞(病毒感染或者肿瘤细胞),Fc段和自然杀伤细胞FcR结合介导杀伤靶细胞。

2)ADCP: 表面结合有抗体的感染微生物,抗体尾部Fc片段被吞噬细胞(如巨噬细胞、中性粒细胞等)表面的Fc受体所识别,导致微生物被吞噬的过程。

3)CDC: 通过特异性抗体与细胞膜表面相应抗原结合,形成复合物而激活补体经典途径,所形成的攻膜复合物对靶细胞发挥裂解效应。

检测方法

  

1)报告基因

基因改造Jurkat细胞作为效应细胞,表达FcR受体和NFAT驱动表达的荧光素酶。抗体与效应细胞受体结合后,激发细胞内NFAT反应,驱动荧光素酶表达,可以通过生物发光进行定量。

  

2)HTRF技术

应用Tag-lite技术,用Lumi4-Tb标记细胞表面CD16a,加入d2标记过的免疫球蛋白IgG,当两者结合时会产生FRET信号,实验样本会竞争性结合,降低FRET信号。

  

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