高通量蛋白检测研究利器——抗体芯片技术
抗体芯片是蛋白芯片的一种,具有微型化、集成化、高通量化的特点,可以用于检测某一特定的生理或病理过程相关蛋白的表达丰度,目前主要用于信号转异、蛋白质组学、肿瘤及其他疾病的相关研究。
我们基于R&Dsystems的抗体芯片技术提供实验室检测服务,每张芯片在设计时都利用了精心挑选的捕获抗体。通过监控蛋白水平和蛋白翻译后修饰的变化,能迅速靶定目标分子,以便进一步的研究。该方法能广泛地应用于信号转导,血管再生,细胞凋亡,肿瘤,肥胖,以及干细胞,药物筛选等研究领域。
抗体芯片可检测多种蛋白,包括胞内蛋白和胞外蛋白。试剂盒均经过多种类型样本验证。抗体芯片检测的样本类型包括提取物、细胞培养上清、血清血浆等,检测的方式通过生物素标记的方法完成样本标记,然后芯片孵育,样本中相关蛋白与芯片上特异性抗体结合,通过荧光的方式使用芯片扫描仪检测。实验获得的数据将通过标准的数据处理流程进行分析。
实验原理
高度特异的捕获抗体点样在NC膜上,与生物素标记的检测抗体通过识别抗原表位,形成捕获抗体-抗原-检测抗体的三明治夹心结构。随后加入HRP结合的链亲和素作为特异标签,与生物素标记的检测抗体结合。最后利用化学发光检测试剂来检测蛋白,产生的信号与结合的分析物呈正比。
检测内容
抗体芯片主要用于蛋白表达谱、蛋白质磷酸等检测
A)蛋白表达谱
抗体芯片可检测一种样品的蛋白表达谱,也可检测两种不同样品间蛋白表达水平的相对差异。单次实验可比较出数百种蛋白(可多达500种)表达水平的变化,其样品可为细胞、组织或体液中提取的蛋白质,可以是总蛋白、胞浆蛋白、核蛋白或细胞器蛋白。
B)蛋白质翻译后加工(磷酸化水平变化)
抗体芯片可从几百种已知蛋白中快速筛选磷酸化水平发生变化的蛋白。蛋白质磷酸化是翻译后加工的主要类型,涉及许多重要细胞功能的改变,是蛋白质活性改变的标志,因此在信号转导研究中有重要意义。
应用领域
抗体芯片技术的主要应用包括发现蛋白质新功能、了解蛋白相关分子机制、分析特定刺激因素激发的信号通路、筛选药物候选的效应分子和发现新的肿瘤生物标记物等。
a)抗体芯片在肿瘤及其它疾病研究中的应用
患者体内某些表达水平上调或下调及活性发生改变的蛋白都可能用于疾病诊断、监测、疗效评价或作为治疗的靶分子。因此,抗体芯片在研究疾病发展过程和寻找疾病标志物进行早期诊断以及新的治疗靶标选择等方面均有重要意义。
b)抗体芯片在信号转导研究中的应用
细胞内存在各种信号转导通路,各通路之间存在复杂的相互作用,形成网络,因此要进行较全面系统的信号转导的研究,必须采用高通量的技术手段。
LabEx检测服务
我们为您提供一站式检测服务,只需联系我们,即可获得专业咨询服务,满足您一切的实验需求。
抗体芯片推荐Panel
Human
LX-ARY001B Proteome Profiler Human Phospho-RTK Array Kit
检测人类RTK的磷酸化情况
Adiponectin, Angiopoietin-1, Angiopoietin-2, Angiopoietin-like 2, Angiopoietin-like 3, BAFF/BLyS, BMP-4, Cathepsin D, Cathepsin L, Cathepsin S, CCL2/MCP-1, CCL5/RANTES, Chemerin, Complement Factor D, C-Reactive Protein, CXCL8/IL-8, DPPIV/CD26, Endocan etc.
LX-ARY004B Proteome Profiler Human Phospho-Immunoreceptor Array Kit
检测人类免疫受体的磷酸化
2B4/SLAMF4, BLAME/SLAMF8, BTLA, CD3 epsilon, CD5, CD6, CD28, CD84/SLAMF5, CD229/SLAMF3, CEACAM-1, CLEC-1, CLEC-2, CRACC/SLAMF7, CTLA-4/CD152, DCIR/CLEC4A, Dectin-1/CLEC7A, DNAM-1, Fc epsilon RII/CD23, Fc gamma RIIA, Fc gamma RIIIA/B, FcRH1/IRTA5, FcRH2/IR等48个因子
LX-ARY007 Proteome Profiler Human Angiogenesis Array Kit
检测人体的血管生成
Activin A, ADAMTS-1, Angiogenin, Angiopoietin-1, Angiopoietin-2, Angiostatin/Plasminogen, Amphiregulin, Artemin, Tissue Factor/Factor III, CXCL16, DPPIV/CD26, EGF, EG-VEGF, Endoglin/CD105, Endostatin/Collagen XVIII, Endothelin-1, FGF acidic, FGF basic etc等59个因子
Mouse
LX-ARY006 Proteome Profiler Mouse Cytokine Array Kit, Panel A
检测小鼠细胞因子
CXCL13/BLC/BCA-1, C5a, G-CSF, GM-CSF, CCL1/I-309, CCL11/Eotaxin, ICAM-1, IFN-gamma, IL-1 alpha/IL-1F1, IL-1 beta/IL-1F2, IL-1ra/IL-1F3, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5,IL-6,IL-7, IL-10, IL-12 p70, IL-13, IL-16, IL-17, IL-23, IL-27, CXCL10/IP-10, CXCL11/I-TAC等40个因子
LX-ARY015 Proteome Profiler Mouse Angiogenesis Array Kit
检测小鼠血管生成
ADAMTS1, Amphiregulin, Angiogenin, Angiopoietin-1, Angiopoietin-3, CCL2/JE/MCP-1, CCL3/MIP-1 alpha, CXCL1/KC, CXCL10/IP-10/CRG-2, CXCL12/SDF-1, CXCL16, CXCL4/PF4, Cyr61/CNN1/IGFBP-10, DLL4, DPPIV/CD26, EGF, Endoglin/CD105, Endostatin/Collagen XVIII等53个因子