自身抗体通常与自身免疫性疾病有关，但作为一种深入了解不同疾病中患者的免疫状态的方法却常被忽略。 它们在患者分层、 反应预测以及诊断和伴随诊断方法的开发方面有着巨大的前景。作为卓越的生物标志物，自身抗体可以便利地从血液样本中获取，且具有稳定的结构、高特异性和高表达量。疾病早期，免疫反应便会产生自身抗体，反映疾病的进展。自身抗体是通过过度表达、突变、从受损组织中释放蛋白质、蛋白质错误折叠或错误呈递而产生的，这些导致它们被免疫系统识别。

技术介绍-Krex folding protein

蛋白质折叠是一个高度复杂的过程。蛋白质合成、水性环境、翻译后修饰和分子伴侣等要素都会影响蛋白质折叠的结果。错误折叠的蛋白质会引起假阳性的检测结果，从而影响蛋白质的检测和交互分析。

Sengenics KREX技术利用生物素羧基载体蛋白 (BCCP) 作为折叠标记和溶解增强剂，从而实现全长、正确折叠和功能性蛋白质的高通量表达，解决了这一痛点，可以定量地筛选成百上千的蛋白质。

BCCP-蛋白质融合物能够在体内或体外被生物素化，从而允许使用高度特异性的生物素-链霉亲和素相互作用进行表面捕获。这种相互作用提供了一种非常优越的方法来将蛋白质束缚到平面上，并且非常适合蛋白质微阵列、玻璃微量滴定板、SPR 和基于磁珠的应用化验。

实验流程：

1.将生物素羧基载体蛋白（BCCP）作为折叠标记和溶解增强剂克隆到KREX蛋白。

2.通过细胞生物素连接酶将生物素导入细胞中并与正确折叠的KREX蛋白连接，BCCP标记的生物素化的KREX蛋白可被固定到特殊处理的链亲和素包被的水凝胶玻璃芯片表面。

3.错误折叠的蛋白质因与BCCP的共翻译出现折叠错误，导致BCCP功能缺失，不能被生物素化，从而不能结合在芯片上。

4.只有正确折叠的蛋白质才能通过BCCP生物素化结合于芯片上，错误折叠的蛋白质会被洗脱。

技术优势

• 检测范围广：完全定量的临床级测定指标，动态线性范围高达五个数量级
• 出色的重复性和精准度，平均CV%
• 高度敏感，检测限约为 1:1,000,000 血清稀释度，自身抗体滴度为 190 pg/mL。
• 卓越的特异性和准确性：由于所有蛋白质都固定为功能性且正确折叠的 BCCP 融合物，因此消除了非特异性结合。
• 正确折叠的功能性蛋白的表达率达到98%

技术应用

Sengenics可以用于不同疾病，包括癌症、自身免疫疾病、神经退行性疾病、传染病中生物标志物的预防、诊断、治疗和筛查。

结果展示

Sengenics分析样本自身抗体（DOI: 10.18632/oncotarget.7359）

类风湿性关节炎患者的抗药抗体候选自身抗体生物标志物（DOI：10.1155/2021/6656121. eCollection 2021.）

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