MSD实验常见问题——实验相关问题
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Q:推荐的稀释浓度?

A:可以参考大鼠检测试剂盒后面的稀释线性测试表格内容,推荐浓度为4倍稀释,具有最好的线性回收。

Q:组织裂解液同质量,不同体积,可以上样吗?

A:严格意义上不可以。

Q:组织裂解液的稀释液是用什么?(V-U系列和信号通路蛋白试剂盒)

A:信号蛋白稀释液采用裂解液,我们一般采用和血清血浆一样的稀释液。

Q:科研的组织/细胞裂解液到底该怎么做?

A:组织/细胞裂解首选是选取一定量的样本进行拉梯度检测,浓度上至少拉到1ug/ul,确认基质效应,但需要综合考虑检出情况,和客户商量合适的稀释倍数和上样浓度。同时总结我们内部的数据,给出参考。

Q:U-plex的LLOQ怎么确定?如果客户不做方法学验证? U只有LLOD,如何初步确认U的LLOQ的值的区间?

A:LLOQ/LLOD都是通过拉20+个重复的梯度,并统计回收率和CV的情况获得。 具体可以参考V系列说明书后面的验证以及生物分析方案的指导原则。

Q:拆封后试剂最长保质时间?涉及到预实验和正式实验之间的时间差,以及客户分批做实验。

A:对外标准一律是按照说明书标准,实际操作过程中有需要单独沟通的再单独讨论。

Q:Aβ和tau试剂盒,是否可以做人血清?

A:Aβ试剂盒仅在人的脑脊液和小鼠血浆中验证 Tau试剂盒在人和小鼠的脑组织匀浆和组织培养上清中验证,提前和客户确认,其他样本类型有一定风险,给出参考文献或者其他资料。

Q:稀释液沉淀,是否需要离心?冻存后,蛋白沉淀,不离心是否对板底有遮蔽作用?

A:应该离心,主要考虑稀释液中的蛋白沉淀会导致样本和捕获抗体的结合位点。

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基因水平:PCR Array、RT-PCR、PCR、单细胞测序
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