2020年8月，国家药品监督管理局药品审评中心（Center for Drug Evaluation，CDE）颁布了《新型冠状病毒预防用mRNA疫苗药学研究技术指导原则（试行）》， 其中CDE发布的《新型冠状病毒预防用mRNA疫苗药学研究》指导建议：建立检测评价细胞免疫的方法（如利用细胞因子Elispot检测评价特异性CTL反应等方法）进行细胞免疫效价的评价。

ELISPOT技术是近年来正为众多研究者所认可的一项通过检测细胞因子,评价T淋巴细胞功能和特异性的新方法。与其它细胞免疫学方法相比较,该法特异性强、灵敏度高、能够直接检测分泌细胞因子细胞,而无需体外扩增。ELISPOT技术对病毒性疾病和肿瘤的发病机制、及体内细胞免疫功能的了解具有重要的意义,也为这些疾病的细胞免疫治疗提供了理论依据。目前,有研究显示该法不仅用于肿瘤疫苗及其治疗中,而且在细胞内感染微生物、自身免疫性疾病发病机制、治疗等方面均有巨大的发展潜力。LabEx母公司优宁维已经成为德国艾迪（AID）授权的旗下酶联免疫斑点分析仪产品的一级代理，并提供ELISpot(酶联免疫斑点技术)的整体解决方案。

一、mRNA疫苗

mRNA疫苗是将外源目的基因序列通过转录、合成等工艺制备的mRNA通过特定的递送系统导入机体细胞并表达目的蛋白、刺激机体产生特异性免疫学反应，从而使机体获得免疫保护的一种核酸制剂。

生物学活性研究

体内药效实验：建议建立检测评价细胞免疫的方法（如利用细胞因子Elispot检测评价特异性CTL反应等方法）进行细胞免疫效价的评价。

应用

①mRNA疫苗在新冠中的应用

新冠mRNA疫苗是将编码新冠病毒S蛋白的mRNA传递至体内，合成的S蛋白刺激机体产生抗体。

②mRNA疫苗在肿瘤防治中的应用

肿瘤mRNA疫苗能够激活人体免疫系统，从而能够对特定肿瘤做出免疫反应。一般包括将疫苗传递至树突状细胞，或者直接传递至体内。目前主要应用在急性骨髓白血病。转移黑色素瘤中。

二、酶联免疫斑点技术（ELISPOT）

基本原理

ELISPOT即酶联免疫斑点检测，英文：Enzyme-linked Immunospot Assay。它结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术（即ELISA技术），能够在单细胞水平检测细胞因子的分泌情况。其技术原理，一句话概括就是：用抗体捕获培养中的细胞分泌的细胞因子，并以酶联斑点显色的方式将其表现出来。

应用方向

移植中排斥反应的预测、疫苗发展、Th1/Th2分析、自身免疫病研究、肿瘤研究、过敏性疾病研究、感染性疾病研究、抗原决定簇图谱分析、化合物和药物免疫学反应的筛选等等。

特点

①灵敏度高：在一百万个阴性细胞中只要有一个分泌细胞因子的阳性细胞即可被检测出来；

②单细胞水平，活细胞功能检测：ELISPOT检测的是单个细胞分泌，而非细胞群体的平均分泌；

③操作简便经济，可以进行高筒量筛选：操作简便经济，可以进行高筒量筛选。